我們所說的微生物學實驗室是生物學領(lǐng)域的一個基本實驗室。那么我們對于一個完備的微生物學實驗室，我們都有哪些注意事項呢?

微生物實驗室基本儀器及要求

1、超凈工作臺

微生物的培養(yǎng)都是在特定培養(yǎng)基中進行無菌培養(yǎng)，那么無菌培養(yǎng)必然需要超凈工作臺提供一個無菌的工作環(huán)境。超凈工作臺的主要用途是微生物的接種及處理時的無菌操作。

2、無菌室（接種室）或接種箱

要培養(yǎng)微生物，首先就需要接種，而接種必須在無菌條件下進行。這就需要建造無菌室或接種箱，為接種創(chuàng)造必要的條件。

無菌室可以建在實驗室內(nèi)，作為實驗室的一個小套間。面積為4~5平方米，高2.5米左右。無菌室外應(yīng)連接一個小緩沖間，面積為2平方米左右。緩沖間和無菌室的門不要建在同一條直線上，以減少空氣中雜菌進入無菌室。

無菌室和緩沖間應(yīng)作到清潔、密閉性好，室內(nèi)最好有換氣設(shè)備，以便在工作結(jié)束后更換室內(nèi)空氣。兩個房間中應(yīng)各安裝1盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈，無菌室的紫外線燈應(yīng)懸吊在工作臺的正上方，距臺面1米，以發(fā)揮最大的消毒功能。無菌室內(nèi)的工作臺等用具用品，應(yīng)經(jīng)常保持清潔，避免雜菌污染。

如果沒有條件建造無菌室，可以用木制的接種箱代替。接種箱結(jié)構(gòu)簡單，容易制作，其正面安裝玻璃，便于觀察。箱前方開兩個圓洞各接連1只套袖，操作時將兩臂從套袖伸入箱內(nèi)進行操作。箱內(nèi)也應(yīng)懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。

3、培養(yǎng)箱

培養(yǎng)箱有很多種類型，它的用途在于為微生物提供一個適宜的生長環(huán)境。主要類型包括生化培養(yǎng)箱，霉菌培養(yǎng)箱，厭氧培養(yǎng)箱等。它們的區(qū)別主要在于：

a.生化培養(yǎng)箱只能控制溫度。這類培養(yǎng)箱可作為一般細菌的平板培養(yǎng)。

b.霉菌培養(yǎng)箱可以控制濕度和溫度。它主要用在霉菌的培養(yǎng)。

c.CO2培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng)，例如，雙歧桿菌。

4、天平

它是用于精確稱量各類試劑。實驗室常用的是電子天平，電子天平按照精度不同又有不同的級別。

5、微生物均質(zhì)器

它的作用在于從固體樣品中提取細菌。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測樣本具有樣品無損傷、無污染、不升溫、不需要洗刷器皿，不需滅菌處理等特點，是微生物實驗中使用較為方便的儀器。

6、菌落計數(shù)器

菌落計數(shù)儀可幫助操作者計數(shù)菌落數(shù)量。通過放大、拍照、計數(shù)等方式準確獲取菌落的數(shù)量。有些高性能的菌落計數(shù)器還可直接連接電腦來完成自動計數(shù)的操作，方便快捷的計數(shù)。

7、微波爐/電爐

它主要用于溶液的快速加熱，微生物固體培養(yǎng)基的加熱熔化。

8、高壓滅菌鍋

微生物學所用到的大部分實驗物品、培養(yǎng)基、試劑都應(yīng)嚴格通過消毒滅菌。滅菌鍋也有不同的大小型號，有些是手動的，有些是全自動的。用戶就要根據(jù)自己的需要選購。

9、移液器

它是用于精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒、微量取液器、移液管、刻度試管、燒杯等。

10、冰箱

冰箱是實驗室中保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學實驗中用到的試劑有些要求是4度保存，有些要求是負20度保存，實驗人員一定要看清試劑的保存條件，放置在恰當?shù)臏囟认卤４?。具體來說，不同溫度下保存的物品如下：

a.4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。

b.-20℃適用于某些試劑、藥品、配好的抗生素等。

c.-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態(tài)等的保存。

11、生物安全柜

微生物實驗中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的，對于操作人員來說傷害比較大。為了防止有害的懸浮微粒、氣溶膠的擴散，可以利用生物安全柜對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全的保護作用。

12、搖床

搖床是實驗室比較常用的一種儀器，在微生物實驗操作過程中，液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌時需要在特定溫度下振蕩使用。

13、純水裝置

純水裝置包括純水機和蒸餾水器。蒸餾水器的價格比較便宜，但在造水過程中需要有人值守；純水機價格高些，但是使用方便，可以儲存一定量的純水。純水的使用也有不同級別，實驗中配制試劑，配制培養(yǎng)基均都需用純水。

14、生物顯微鏡

由于微生物的體積比較小，所以在觀察時需要借助生物顯微鏡。生物顯微鏡主要用于微生物和微小物品結(jié)構(gòu)和形態(tài)等方面的觀察。

15、冷凍干燥機

主要適用于細菌、微生物、酵母等的干燥作用。用于干燥保存易脫水的產(chǎn)品，在加水以后能夠再次恢復原材料的特性，不影響其生物活性。通過冷凍干燥，細菌之類的材料成為干燥狀態(tài)，從而不會發(fā)生化學改變。

16、分光光度計

分光光度計在微生物試驗中用于測定微生物懸液的濃度，可以正確選取合適的培養(yǎng)時間。一般是在600nm波長測定菌液濃度。

17、恒溫箱

用于恒溫條件下培養(yǎng)微生物。恒溫箱的調(diào)溫范圍一般為20～45℃之間。培養(yǎng)酵母菌和霉菌時，一般可調(diào)至28℃，培養(yǎng)細菌和放線菌時，可根據(jù)菌種的生長溫度進行調(diào)溫，一般為30～37℃。

18、電烘箱（干燥箱）

用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌。電烘箱的調(diào)溫的范圍一般為40～180℃，對玻璃器皿等物進行滅菌時，可將溫度調(diào)至160℃，滅菌4小時，即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢后，在電烘箱溫度還沒有降到50～70℃以前，不要打開電烘箱，以免器皿破裂。

19、恒溫水浴鍋

水浴鍋是一種控溫裝置，水浴控溫對于樣品來說比較快速且接觸充分。有些微生物反應(yīng)需要在37度，42度，56度下水浴進行，所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度。

20、酸度計

用于配制試劑時精確測量pH值，從而保證配制的溶液的精確性。有時也需要利用pH計測定樣品溶液的酸堿度。

21、離心機

用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機有冷凍和常溫之分。有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定，需要低溫環(huán)境，要視樣品的種類而定。

離心機洗要求：

在離心機內(nèi)腔，設(shè)置多個清洗頭或清洗管，離心機可在不開蓋或運轉(zhuǎn)過程中對離心機內(nèi)部進行清洗。重點有以下幾個部位：①轉(zhuǎn)鼓底面及軸承座部位的清洗；②攔液板表面及轉(zhuǎn)鼓筒體外表面；③轉(zhuǎn)鼓筒體內(nèi)表面；④翻蓋內(nèi)表面及進料、刮刀等裝置表面；⑤外殼內(nèi)表面。 

離心機維護規(guī)則：

（1）一次規(guī)則  

當系統(tǒng)出了故障，你可以試探性地改變某些狀態(tài)，一次可以改變一個參數(shù)。做一些簡單的改變步驟，也許就能解決問題。 

（2）二次比較規(guī)則

在動手檢修之前已經(jīng)明確了故障所在，或者已經(jīng)確定了解決故障的方案。換句話說，動手之前已經(jīng)找對了解決辦法。例如，在進樣過程中發(fā)現(xiàn)內(nèi)標物的峰值變低了，可以重復進樣看看重復性如何，如果是偶然變低，是否是定量管里進了氣泡。這個規(guī)則可用于考察系統(tǒng)改變后的情況。更換了流動向后在正式進樣前可以進兩次標準品以檢查保留時間的穩(wěn)定情況和色譜峰的穩(wěn)定性。在梯度洗脫中如果出現(xiàn)了多余的峰，可以空載梯度洗脫一次(真的有問題嗎？)，用此規(guī)則可以避免不必要的改變，盡快確定糾正措施。 

 （3）取代規(guī)則  

用好的部件換下可疑的部件，是查找故障的最好方法。如果你懷疑檢測器引起了噪音，就換一個性能好的無轉(zhuǎn)子硫化儀檢測器。如果故障被排除了，就說明換下的檢測器有問題。這個規(guī)則應(yīng)用的規(guī)模有大有小，可以從換整個部件到換印刷線路板上的集成塊。

（4）換回規(guī)則

這個規(guī)則和取代規(guī)則一起運用，好部件取代了溶體流動速率測定儀可疑部件后情況并未得到改善，應(yīng)重新?lián)Q上原部件。這樣做的維修費用最小，也防止了用過的部件積壓下來無轉(zhuǎn)子硫化儀。這條規(guī)則僅適用于單一的故障。換回原則不適用于以下的情況：   

①在取下時新部件已損壞(如泵密封墊圈)；  

②部件價格低(如柱內(nèi)襯過濾片)；  

③重新裝上原部件要冒損壞的風險；  

④定期更換的部件。   

22、液氮罐

液氮罐儲存液氮，可用于細菌、酵母、霉菌和大型真菌等各種微生物的長期保存。

23、接種針

用于接種和分離微生物。根據(jù)不同用途做成針狀、環(huán)狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金（細電爐絲）制成，長約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管制成，長約20厘米。將針頭燒結(jié)在針柄上即成。

24、酒精燈

用于接種時對接種工具進行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高，應(yīng)利用這一最高溫度區(qū)燒灼接種針或試管口。

25、均質(zhì)器

均質(zhì)器使樣品處理過程中不可缺少的設(shè)備。常用的均質(zhì)器主要是旋轉(zhuǎn)均質(zhì)器和拍擊式均質(zhì)器。

旋轉(zhuǎn)式均質(zhì)器是靠旋轉(zhuǎn)的刀片將均質(zhì)杯中的樣品打碎。缺點是每次均質(zhì)都要更換刀片和均質(zhì)杯，樣品易受到污染，均質(zhì)過程中容易產(chǎn)生熱量使樣品中的微生物受損。

拍擊式均質(zhì)器使用無菌均質(zhì)袋，拍擊的機械裝置作用在均質(zhì)袋上，不和樣品直接接觸，因此不會受污染。拍擊式均質(zhì)器由于使用方便，不易受污染，使用越來越廣泛。但其缺點是均質(zhì)的力量不足，對于堅硬的樣品不但無法均質(zhì)均勻，還會引起均質(zhì)袋的破損。

使用注意事項：

（1）使用前先將電源插頭固定牢靠后，再打開機器開關(guān)。插頭不能使其出現(xiàn)松動，因為機器工作時會產(chǎn)生振動導致插頭脫落。這種突然短點對機器會造成損傷。

（2）均質(zhì)器工作時不準隨便打開均質(zhì)器門，防止樣液飛濺（有的均質(zhì)器打開門以后自動停止拍擊均質(zhì)） ，一定要先關(guān)機器再開門，然后同樣關(guān)閉門之后再開機。

（3）使用均質(zhì)器之前，一定要檢查均質(zhì)器內(nèi)是否有異物，防止損傷機械裝置或均質(zhì)袋。

（4）堅硬樣品，盡量不要用拍打式均質(zhì)器，防止均質(zhì)袋破裂，冷凍樣品需緩化解凍以后才能使用拍擊式均質(zhì)器。當一定要拍打堅硬樣品時，最好加套均質(zhì)袋。

（5）均質(zhì)器的底部是空的，如遇均質(zhì)袋意外破裂時，方便清理溢出物。

（6）均質(zhì)器和均質(zhì)袋放置在陰涼干燥處，特別是均質(zhì)袋應(yīng)避酸堿、避陽光，防止其過早的變脆老化。

（7）均質(zhì)器用完之后，先關(guān)機斷電，然后將其內(nèi)外清理干凈。

（8）對于一些拍打均質(zhì)后，容易堵塞移液管或移液器槍頭的樣品，建議使用帶過濾網(wǎng)的無菌均質(zhì)袋。

26、常用玻璃器皿

①培養(yǎng)皿（平皿）：用于盛放固體培養(yǎng)基，是培養(yǎng)微生物和觀察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米?？筛鶕?jù)活動規(guī)模準備若干個。

②試管：用于盛放斜面培養(yǎng)基（固體），是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長220毫米，直徑20毫米；較小的長150毫米，直徑15毫米。可根據(jù)需要選用其中一種并準備若干個。

③錐形瓶：用于盛放液體培養(yǎng)基。是用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升?？筛鶕?jù)活動需要選擇和準備。

④量筒、量杯：用于定量量取各種液體。

⑤移液管（吸管）：一般容量為0.5、1、5、10毫升等，可根據(jù)需要選擇和準備。

⑥其它：燒杯、漏斗等。

注意事項：

以上介紹的是微生物實驗室的基本儀器配置，在組建實驗室時還需要其他一些耗材，例如試管架，無菌采樣及稱樣袋，接種環(huán)，三角瓶，量筒，脫脂棉，紗布，試管筐，玻璃試管，滅菌吸管，涼干架，剪刀，鑷子，過濾器等。