一：揮發(fā)性有機物及氰化物毒性浸出

作業(yè)指導規(guī)范：

1 試劑

1.1 試劑水：使用符合待測物分析方法標準中所要求的純水。

2 浸提劑

2.1浸提劑2#：試劑水，用于測定氰化物和揮發(fā)性有機物的浸出毒性。

3 儀器設備

3.1 振蕩設備：轉(zhuǎn)速為30±2r/min 的翻轉(zhuǎn)式振蕩裝置（GGC-W翻轉(zhuǎn)式振蕩器）。

3.2 提取容器，零頂空提取器（Zero-Headspace Extraction Vessel，以下簡稱ZHE）：500ml，用于樣品中揮發(fā)性物質(zhì)浸出的專用裝置。

4 過濾裝置

4.1 零頂空提取器（ZHE）：分析樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)，采用ZHE 進行過濾。

4.2濾膜：微孔濾膜，孔徑0.8μm，直徑：90mm.

4.3 ZHE 浸出液采集裝置：采用玻璃
制作的500ml注射器采集初始液相或終的浸出液。

4.4 ZHE 浸提劑轉(zhuǎn)移裝置：可以使用任何不改變浸提劑性質(zhì)的導入設備流體計量泵。

4.5存儲裝置：TEDLAR采樣袋

5 實驗設備

5.1實驗天平：精度為±0.01g。

5.2 燒杯或錐形瓶：玻璃，500ml。

5.3 表面皿：直徑可蓋住燒杯或錐形瓶。

5.4 篩：涂Teflon 的篩網(wǎng)，孔徑9.5mm。

5.5高壓氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）

5.6恒溫干燥箱

5.7土壤研磨機

5.8冰箱

6 、樣品的保存和處理：
除非冷藏會使樣品性質(zhì)發(fā)生不可逆改變，樣品應于4°C 冰箱冷藏保存。

二：浸出步驟：

一、樣品無初始液相：（指的是干質(zhì)量的采集樣品，看不到明顯的液體，）

1、取樣品100g測定樣品含水率，稱取100g樣品置于具蓋容器中，于105℃下烘干，恒重至兩次稱量值的誤差小于±1%，計算樣品含水率，含水率測定公式= (濕重-干重)/濕重 * 100%，例如：稱取100g 于105℃下烘干，恒重至兩次后的重量為90g，則此次采集樣品中含水率則為（100-90）/100*100=10%（一般測定含水率的樣品不能在進行毒性浸出試驗）.

2、樣品用土壤研磨機破碎樣品顆粒應可以通過9.5mm 孔徑的篩，對于粒徑大的顆?？赏ㄟ^破碎、切割或碾磨降低粒徑。因為測定的是揮發(fā)性有機物，為避免過篩時有待成分揮發(fā)，應用刻度尺測量粒徑，樣品和降低粒徑工具需要冷卻。

3、(1)將零空間萃取器的頂蓋旋緊，用PU管把零空間萃取器與氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）連接好,緩慢加壓，直到活塞頂?shù)搅憧臻g萃取器上蓋，把上蓋取下，然后再把活塞取下來，再以蒸餾水潤濕零空間萃取器筒壁。

(2)將活塞由頂層平衡放入零空間萃取器中，向下推至距上蓋1cm處（目的是要讓萃取器里面有足夠的空間盛放樣品）。

4、將30g新樣品(指沒有進行過含水率測試并且冷卻至4℃的樣品)倒入零空間萃取器中，然后放上一個不銹鋼濾網(wǎng)，把用超純水潤濕過的微孔濾膜（90mm）放入個鋼制濾網(wǎng)的上面（微孔濾膜無正反面），然后放上第二個濾網(wǎng)，要同心放置，防止錯位。

5、放上蓋子，用工具把4個螺絲旋緊固定好，要特別注意在旋緊的過程中不能把其中一個螺絲旋到緊再去旋其他螺絲，要跟上法蘭盤似的4個逐漸旋緊，防止造成空隙而漏氣；

6、根據(jù)樣品含水率10%，計算出30g樣品中含水量為（30g*10%=3g）, 從而算出30g新樣品中干固體的重量為30g-3g=27g然后按照液固比為10：1（l/kg）計算出浸提劑的體積（即270ml），打開底層排氣閥及頂層開關閥，頂層開關接上流體計量泵，調(diào)整流速后將電源插上，此時便開始輸入浸提劑。

7、輸送完畢后拔掉輸送泵電源插頭，關閉頂層開關閥并將管路取下，靜置10分鐘左右，把零空間萃取器上下閥門都關閉，零空間萃取器下面氣嘴與氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）用PU管連接好，把氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）上面的閥門打開，然后再打開零空間萃取器下面的閥門，開始用氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）給零空間萃取器加壓，看零空間萃取器壓力表數(shù)值達到20psi就停止加壓，關閉零空間萃取器下面閥門，撤掉氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量），這時把零空間萃取器上面氣嘴連上一節(jié)硅膠管，輕輕旋動閥門上的黑色旋鈕（注意：一定要輕輕旋動）當看到硅膠管看到出現(xiàn)水柱時（說明零空間萃取器里面的空氣已經(jīng)全部頂出），迅速旋動黑色旋鈕，關閉閥門.

8、將零空間萃取器固定在翻轉(zhuǎn)振蕩器上，注意應以十字形對稱方式放置，并注意底層零件于旋轉(zhuǎn)時不會碰撞到其他物品，且周圍環(huán)境不會妨礙旋轉(zhuǎn)器的操作。并以30±2轉(zhuǎn)/min的速度振蕩18±2h。

9、翻轉(zhuǎn)振蕩器時間的設定：在主機定時器上有小時，分，秒標志，可通過總定時器上的“十”“一”按鈕任意設定，根據(jù)自己需要設定萃取時間。如18小時設定，只須按動定時器下方中間按鈕把標志定在H上，通過左側按鈕設為1，第二按鈕設為8，右側兩個按鈕均設為0即可，（2）總時間定好之后再設定正反轉(zhuǎn)定時器，正反轉(zhuǎn)定時器時間設定與總定時時間設定方式大致一樣，只是正反轉(zhuǎn)定時器前兩位數(shù)字為間隔時間，后兩位數(shù)字為工作時間，如設計間隔時間為5S，工作時間為9小時，只需將前兩位設定為05S后兩位設定為09H即可，千萬不可以將間隔時間與工作時間設定為零，儀器正常啟動前請放下儀器正面卡扣，儀器工作期間工作人員千萬不可靠近儀器轉(zhuǎn)動部分，打開電源開關，將電機調(diào)速器調(diào)至一個合適的翻轉(zhuǎn)頻率，不要太快也不要太慢即可，大約調(diào)至90左右即可，因為電機速比為3:1，所以調(diào)速器調(diào)至90即為每分30轉(zhuǎn)，首次開機大約20秒左右，好開蓋放氣，中途如需再放氣只須按暫停開關開蓋放氣即可。

10、實驗完畢后把零空間萃取器取下，頂層開關閥打開并接上氣密式注射器，從底層緩慢加壓，讓浸出液從零空間萃取器中緩慢流入氣密式注射器中，上述動作一直持續(xù)到頂層出口不在冒出液體后，關閉頂層開關并拔掉底層的快速氣體插頭，此時整個過濾完成。將氣密式注射器中的液體儲存并待分析。

二 、樣品有初始液相：（指的是干濕質(zhì)量的采集樣品，看到明顯的固體和液體）

1、含有初始液相樣品進行含水率測定的時候需要先將樣品進行過濾之后測定濾渣的含水率與干固體百分率。

2、具體測量方式如下：

（1）將零空間萃取器的頂蓋旋緊，用PU管把零空間萃取器與氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）連接好,緩慢加壓，直到活塞頂?shù)搅憧臻g萃取器上蓋，把上蓋取下，然后再把活塞取下來，再以蒸餾水潤濕零空間萃取器筒壁。

（2）將活塞由頂層平衡放入零空間萃取器中，向下推至距上蓋1cm處（目的是要讓萃取器里面有足夠的空間盛放液體），再將底層鎖緊。

（3）比如：將100g含有初始液相樣品倒入零空間萃取器中，然后放上一個不銹鋼濾網(wǎng)，把用超純水潤濕過的微孔濾膜（90mm）放入個鋼制濾網(wǎng)的上面（微孔濾膜無正反面），然后放上第二個濾網(wǎng)，要同心放置，防止錯位。

(4)、放上蓋子，用三個螺絲旋緊固定好，要特別注意在旋緊的過程中不能把其中一個螺絲旋到緊再去旋其他螺絲，要跟上法蘭盤似的四個逐漸旋緊，防止造成空隙而漏氣；

(5)、將零空間萃取器頂層開關閥打開并接上氣密式注射器，零空間萃取器與氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）連接好，從底層緩慢加壓，讓液體從萃取器中緩慢流入氣密式注射器中，上述動作一直持續(xù)到頂層出口不在冒出液體后，關閉頂層開關并拔掉底層的快速氣體插頭，此時過濾完成。

3、將過濾完的濾渣至于具蓋容器中，于105℃下烘干，恒重至兩次稱量值的誤差小于±1%，計算樣品含水率與干固體百分率。例如：100g樣品過濾完濾渣含量為60g,烘干恒重完為50g,則根據(jù)①含水率=(濾渣濕重-濾渣干重)/濾渣濕重 * 100%即(60g-50g)/60*100%=16%,②干固體百分率=濾渣干重/過濾前樣品的總重量*100%即50/100*100%=50%

4、測定干固體百分率≦9%，則直接分析玻璃注射器中的液體即可。

5、如果說之前測定干固體百分率＞9%，（以上測的干固體百分率為50% 是大于9%的）則還需要進行以下的實驗步驟：（一般測定含水率的樣品不能在進行浸出毒性試驗）.

（1）、取70克新樣品，用零空間萃取器與濾膜對樣品進行 過濾，具體方法同前。將過濾完初始液相在氣密式注射器或梯拉德采樣袋放入冰箱4℃冷卻保存。

（2）、根據(jù)之前測定樣品含水率16%計算中濾渣30g中的含水量（即30g*16%=4.8g，從而算出30g濾渣中干固體的重量為30g-4.8g=25.2g然后按照液固比為10：1（L/kg）計算出浸提劑的體積（即252ml）打開底層排氣閥及頂層開關閥，頂層開關接上流體計量泵，調(diào)整流速后將電源插上，此時便開始輸入浸提劑。

6、輸送完畢后拔掉輸送泵電源插頭，關閉頂層開關閥并將管路取下，靜置10分鐘左右，把零空間萃取器上下閥門都關閉，零空間萃取器下面氣嘴與氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）用管子連接好，把氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）上面的閥門打開，然后再打開零空間萃取器下面的閥門，（注意：零空間萃取器上面閥門一定要關閉）。開始用氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量）給零空間萃取器加壓，看零空間萃取器壓力表數(shù)值達到20psi就停止加壓，關閉零空間萃取器下面閥門，撤掉氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣體流量），這時把零空間萃取器上面氣嘴連上一節(jié)硅膠管，輕輕旋動閥門上的黑色旋鈕（注意：一定要輕輕旋動）當看到硅膠管看到出現(xiàn)水柱時（說明零空間萃取器里面的空氣已經(jīng)全部頂出），迅速旋動黑色旋鈕，關閉閥門.

7、將零空間萃取器固定在翻轉(zhuǎn)振蕩器上，注意應以十字形對稱方式放置，并注意底層零件于旋轉(zhuǎn)時不會碰撞到其他物品，且周圍環(huán)境不會妨礙旋轉(zhuǎn)器的操作。并以30±2轉(zhuǎn)/min的速度振蕩18±2h。

8、翻轉(zhuǎn)式振蕩器時間的設定：在主機定時器上有小時，分，秒標志，可通過總定時器上的“十”“一”按鈕任意設定，根據(jù)自己需要設定萃取時間。如18小時設定，只須按動定時器下方中間按鈕把標志定在H上，通過左側按鈕設為1，第二按鈕設為8，右側兩個按鈕均設為0即可，（2）總時間定好之后再設定正反轉(zhuǎn)定時器，正反轉(zhuǎn)定時器時間設定與總定時時間設定方式大致一樣，只是正反轉(zhuǎn)定時器前兩位數(shù)字為間隔時間，后兩位數(shù)字為工作時間，如設計間隔時間為5S，工作時間為9小時，只需將前兩位設定為05S后兩位設定為09H即可，千萬不可以將間隔時間與工作時間設定為零，儀器正常啟動前請放下儀器正面卡扣，儀器工作期間工作人員千萬不可靠近儀器轉(zhuǎn)動部分，打開電源開關，將電機調(diào)速器調(diào)至一個合適的翻轉(zhuǎn)頻率，不要太快也不要太慢即可，大約調(diào)至90左右即可，因為電機速比為3:1，所以調(diào)速器調(diào)至90即為每分30轉(zhuǎn)，首次開機大約20秒左右，好開蓋放氣，中途如需再放氣只須按暫停開關開蓋放氣即可。

9、旋轉(zhuǎn)初期的30分鐘內(nèi)，需開關底層排氣閥數(shù)次，以排除旋轉(zhuǎn)初期產(chǎn)生過大的壓力。然后便開始進行18小時的萃取。

10、萃取完成后，將零空間萃取器頂層接上氣密式注射器，并打開閥門，零空間萃取器與氮氣鋼瓶（或無油空氣壓縮機，易于控制壓力及氣量）連接好，從底層緩慢加壓，讓浸出液從零空間萃取器中緩慢流入氣密式注射器中，上述動作一直持續(xù)到頂層出口不在冒出液體后，關閉頂層開關并拔掉底層的快速氣體插頭，此時過濾完成。對零空間萃取器進行第二次加壓收集濾液。

11、將次與第二次收集的液體進行混合，并將濾液注射到TEDLAR采樣袋進行冷藏保存待分析即可。